Новости
09.05.2023
с Днём Победы!
07.03.2023
Поздравляем с Международным женским днем!
23.02.2023
Поздравляем с Днем защитника Отечества!
Оплата онлайн
При оплате онлайн будет
удержана комиссия 3,5-5,5%








Способ оплаты:

С банковской карты (3,5%)
Сбербанк онлайн (3,5%)
Со счета в Яндекс.Деньгах (5,5%)
Наличными через терминал (3,5%)

ДИНАМИКА ФОРМИРОВАНИЯ МЕХАНИЧЕСКОЙ АЛЛОДИНИИ В УСЛОВИЯХ АЛКОГОЛЬНОЙ ДЕПРИВАЦИИ У КРЫС В ЗАВИСИМОСТИ ОТ УРОВНЯ АЛКОГОЛЬНОЙ МОТИВАЦИИ

Авторы:
Город:
Москва
ВУЗ:
Дата:
22 мая 2016г.

При злоупотреблении алкоголем в среднем у 10% больных наблюдается развитие периферической нейропатии, для которой характерны спонтанные боли, гиперальгезия и аллодиния, усиливающиеся в период алкогольной абстиненции [2]. Для изучения этих процессов применяются модели, при которых крысам-самцам линии Вистар и Sprague-Dawley вводят в течение 10 недель значительные  дозы этанола (10 г/кг; 35 vol % раствора; перорально через зонд), превышающие почти в 2 раза среднесуточные при добровольном потреблении у беспородных крыс со сформировавшейся устойчивой алкогольной мотивацией. [3, 5] Ранее нами были получены данные о разделении гетерогенной популяции беспородных крыс при принудительной алкоголизации 10 vol % раствором этанола (более 5,0±0,1 г/кг в сутки) при помощи математических моделей на несколько групп, отличающихся по степени предпочтения этанола. И исследовано в тесте von Frey изменение периферической чувствительности только у группы крыс с высоким уровнем алкогольной мотивации, у которой наблюдалось статистически значимое снижение порогов реакции к механическому воздействию после 48-ч алкогольной депривации [1]. Динамика формирования изменения порогов реакции в тесте von Frey на протяжении 48 часов у всех групп с разным уровнем предпочтения этанола осталась неизученной. Считаем необходимым применить дифференцированный подход при изучении динамики формирования механической аллодинии в условиях алкогольной абстиненции у крыс с разным уровнем алкогольной мотивации.

Материалы и методы.

Для моделирования алкогольной зависимости использовали методику принудительной алкоголизации животных с предоставлением 10 vol % раствора этанола в качестве единственного источника жидкости в течение 24-х недель. Исследование выполнено на беспородных крысах-самцах (n=35). Животных содержали в индивидуальных клетках в стандартных условиях вивария ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова» с предоставлением брикетированного корма ad libitum при регулируемом 12/12 световом режиме в соответствии с приказом МЗ РФ № 708н от 23.08.2010 «Об учреждении Правил лабораторной практики». Раз в неделю регистрировали изменение массы тела животных и количество потребляемого этанола (в г/кг). В процессе принудительной алкоголизации крысы потребляли физиологически значимые количества этанола (5,8±0,1 г/кг в сутки в пересчете на этанол). Для оценки характера формирования алкогольной зависимости проводили тестирование животных на наличие алкоголь-депривационного эффекта (АДЭ) после окончания периода алкогольной депривации (48 часов). Потребление этанола регистрировали в первые 90 мин при предоставлении животным свободного выбора между водой и 10 % раствором этанола, а также по потреблению (г/кг) и предпочтению (%) этанола в течение последующих 24 часов. Для выявления фенотипов, различающихся по степени выраженности алкогольной мотивации, был привлечен иерархический кластерный анализ (метод Уорда, Евклидово расстояние) [1].

Животные группы «Интактные» (n=10) содержались в идентичных условиях без доступа к этанолу. Оценка аллодинии.

Порог реакции в ответ на механическую стимуляцию определяли с использованием калиброванных филаментов von Frey (0.04, 0.07, 0.16, 0.40, 0.60, 1.00 г), прикладывая их через перфорированный пол к задним лапам крыс, помещенных в отдельные камеры из плексигласа. Быстрое отдергивание лапы рассматривали как положительный результат. В случае положительной реакции использовали следующий филамент меньшего диаметра или тот же волосок, если отсутствовали лизание или передергивание лапы. Порог чувствительности определяли по минимальному давлению, вызывающему рефлекторную реакцию отдергивания лапы (3 раза из 5- ти попыток). Значительное снижение порогов чувствительности при аппликации филаментов рассматривали как механическую аллодинию [4]. Оценку аллодинии проводили через 5, 24 и 48 часов после отмены этанола.

Методы статистики.

Использовали иерархический кластерный анализ (метод Уорда, Евклидово расстояние), тест Краскел- Уоллеса, тест множественных сравнений средних рядов для всех групп. Данные представлены в Me (25q; 75q).

Результаты исследования.

Для разделения гетерогенной популяции беспородных белых крыс на группы с разным уровнем предпочтения этанола использовался иерархический кластерный анализ Эвклидовых расстояний по методу  Уорда. В Табл.1. показано разделение популяции крыс на три основные группы по уровню алкогольной мотивации: высокий; средний и низкий уровни.

Таблица 1  

Характеристика экспериментальных групп по уровню алкогольной мотивации. Me (25q; 75q).


 

 

 

Уровни алкогольной мотивации

 

 

 

Количество животных в группе

Среднесуточное

потребление этанола за период принудительной алкоголизации, г/кг

 

 

 

Алкоголь- депривационный эффект, г/кг

 

 

Потребление этанола, г/кг

 

 

Предпочтение этанола, %

«высокий»

14

5,81 (5,44; 6,39)

0,78 (0,54; 0,85)

5,18 (4,62; 5,91)

76,8 (73,2; 80,8)

 

«средний»

 

14

 

5,87 (5,39; 6,35)

 

0,46 (0,30; 0,66) *

3,05 (2,43; 3,62)

**

41,9 (35,7; 53,0)

***

 

«низкий»

 

7

 

5,56 (4,84; 5,99)

0,21 (0,20; 0,32)

***

0,93 (0,58; 1,44)

***

12,0 (5,9; 18,0)

***

 

Краскел-Уоллес тест

H ( 2, N= 35)

H ( 2, N= 35)

H ( 2, N= 35)

H ( 2, N= 35)

=1,151020

=17,92041

=26,20952

=28,81837

p=0,5624

p=0,0001

p=0,0000

p=0,0000

Примечание. * - р<0,05, ** - р<0,01, *** - р<0,001 статистически значимо по сравнению с группой с

«высоким уровнем алкогольной мотивации» согласно тесту множественных сравнений средних рядов для всех групп.

 

Установлено статистически значимое снижение порогов тактильной чувствительности к механическому неболевому воздействию только у животных с высоким и средним уровнем алкогольной мотивации, у которых выявлена динамика снижения порогов реакции на фоне лишения алкоголя через 24 и 48 часов, что может указывать на развитие механической аллодинии. В группе с низким уровнем предпочтения этанола снижение порогов чувствительности не наблюдалось (Рисунок 1).


Таким образом, удалось установить, что в группе с низким уровнем алкогольной мотивации во время отмены этанола не наблюдались изменения порогов тактильной чувствительности в отличие от групп со средним и высоким уровнем. В группе с высоким уровнем алкогольной мотивации наблюдалось значительное снижение порогов реакции через 24 и 48 часов после отмены этанола.

 

Список литературы

1.     Колик Л.Г., Надорова А.В., Козловская М.М. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2014.

№1. С.61-65.

2.     Dina OA, Khasar SG, Alessandri-Haber N et al. // Eur J Neurosci. 2008. Jan;27(1):83-92.

3.     Han KH, Kim SH, Jeong IC et al. //. J Korean Neurosurg Soc. 2012. Jul;52(1):32-6.

4.     Shumilla JA, Liron T, Mochly-Rosen D. et al. // J Pain. 2005. V.6, №8. С.535-49.

5.     Tiwari V, Kuhad A, Chopra K. Pain. 2009. Sep;145(1-2):129-35.