27 февраля 2016г.
Введение.
Мочекаменная болезнь (МКБ) – заболевание, наиболее постоянным и существенным признаком которого является образование и присутствие одиночных или множественных камней в системе мочевыводящих путей – почечных чашечках, лоханке, мочеточнике, мочевом пузыре и мочеиспускательном канале.
По данным зарубежной литературы примерно 12% населения всего мира страдает МКБ. Возрастная структура заболеваемости МКБ характеризуется высокими показателями среди лиц трудоспособного возраста, особенно отмечается возрастная группа 25-50 лет. Наиболее часто болезнь регистрируется среди мужчин: от 70% до 81% случаев, у женщин: 47 - 60%.
Мировая практика показала, что лекарственные препараты на основе лекарственного растительного сырья широко применяются в качестве эффективной составляющей консервативного лечения МКБ после удаления мочевых камней, а также в качестве монотерапии для профилактики первичного уролитиаза при наличии факторов риска и рецидивного камнеобразования.
В связи с этим перспективным направлением представляется изучение многокомпонентных лекарственных сборов, обладающих широким спектром фармакологической активности, предназначенных для лечения и профилактики МКБ. Высокая фармакотерапевтическая эффективность этих средств обусловлена гармоничным сочетанием биологически активных веществ, содержащихся в растениях, обеспечивающих не только адекватное воздействие на основные звенья патологического процесса, но и способствующих фармакологической регуляции многих функциональных систем и повышающих адаптивные возможности организма в целом [2].
Нами разработан многокомпонентный растительный сбор для лечения и профилактики уролитиаза на основе листьев Vaccinium vitis-idaea (L.), травы Equisetum arvense (L.), корней Arctium lappa (L.), плодов Anethum graveolens (L.), травы Artemisia vulgaris (L.).
Целью нашей работы являлось детальное изучение аминокислотного состава уролитического сбора. Материалы и методы.
Объектом изучения являлся сбор уролитический на основе листьев брусники, травы хвоща полевого, корней лопуха, плодов укропа огородного, травы полыни обыкновенной. В качестве исследуемых растворов использовали водное извлечение данного уролитического сбора.
Исследование по составу свободных аминокислот проводили методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) [1]. В качестве неподвижной фазы использовали пластины «Kieselgel 60 F254» фирмы «Меrк» в системе растворителей н-бутанол-ледяная уксусная кислота–вода (50:25:25). Смесь растворителей помещали в стеклянную камеру для хроматографии, которую насыщали в течение 2 ч.
В качестве исследуемого раствора использовали водное извлечение из сбора, полученное по следующей методике: около 10,0 г измельчѐнного сырья помещали в колбу вместимостью 250 мл, прибавляли по 70 мл воды дистиллированной для сухого сырья, присоединяли к обратному холодильнику и нагревали на кипящей водяной бане в течение 1 часа с момента закипания смеси в колбе. После охлаждения смесь фильтровали через бумажный фильтр в мерную колбу объѐмом 100 мл и доводили водой дистиллированной до метки (исследуемый раствор).
На линию старта хроматографической пластины наносили 50 мкл исследуемого раствора и по 5 мкл рабочих стандартных образцов (РСО) аргинина, глутаминовой кислоты, пролина, серина, гистидина, глицина, метионина, тирозина и хроматографировали дважды восходящим способом. Длина пробега растворителей 15 см.
Визуализация зон адсорбции после обработки 0,2 % раствором нингидрина в 95 % этаноле (после нагревания при 100-105° С в течение 5 мин.).
Результаты и обсуждение.
Результаты хроматографического анализа аминокислот свободных водного извлечения из фитокомпозиции представлены на рисунке 1. На хроматограмме исследуемого образца идентифицированы 6 окрашенных зон с Rf
~ 0,39 (пролин); Rf ~ 0,46 (глицин); Rf ~ 0,48 (серин); Rf ~ 0,56 (глутаминовая кислота); Rf ~ 0,65 (метионин); Rf ~ 0,72 (тирозин).
Рис.1. Схема хроматограммы аминокислот: 1 – водное извлечение из уролитического сбора; РСО: 2 – глицина; 3 – глутаминовой кислоты; 4 – пролина; 5 – серина;6 – метеонина; 7 – тирозина
Выводы.
1. Методом ТСХ установлено наличие в фитокомпозиции следующих свободных аминокислот: пролин, глицин, серин, глутаминовая кислота, метеонин, тирозин.
2. Разработанная методика качественного обнаружения аминокислот может быть использованы для оценки подлинности предложенного нами уролитического сбора и включена в соответствующую нормативную документацию.
Список литературы
1. Дроздова И.Л. Аминокислотный и микроэлементный состав листьев лопуха // Фармация. – 2004. – № 3. – С. 18–19.
2. Smyslova O.A. et al, 2015. Characteristics of the new comprehensive herbal medicine for the treatment and prevention of urolithiasis. Biology and Medicine, Vol. 7, 2.
