18 марта 2018г.
На кафедре терапевтической стоматологии КРСУ им. Б.Н. Ельцина, группой авторов изобретено стоматологическое средство «Витар», патент КР№1796[1].Поскольку в этиологии и патогенезе пародонтита играют значительную роль свободные и перекисные радикалы, то основным направлением воздействия на пораженные ткани пародонта служит антиоксидантный эффект стоматологического средства, который обеспечивается включением в состав шалфея, цветков ромашки, корней лопуха, семян черного винограда и зеленого чая.
Ранее ученые из Кыргызстана предложили несколько стоматологических средств на основе природных лечебных ресурсов Кыргызстана: «Кирславин», «Аплидонт» и «Фломираль» [5, 6, 7], которые уже доказали в стоматологической практике свою эффективность, внедрены в производство и представлены в аптечной сети.
Пародонтит является большой проблемой в терапевтической стоматологии, приводящей к потере зубов и снижению качества жизни человека [8]. В пожилом и старческом возрасте пародонтитом заболевают более половины населения. В патогенезе пародонтита важную роль отводят активации перекисного окисления липидов (ПОЛ), как системно, так и местно в слюне и тканях пародонта [2, 11]. Патогенетическим лечением и профилактикой болезней пародонта стало использование антиоксидантов, при этом предпочтение отдается не синтетическим, а натуральным препаратам растительного происхождения – фитокомпозитам[4].
Цель настоящей работы провести сравнительный анализ антиоксидантной эффективности лечебно-профилактического средства «Витар» при моделировании пародонтита в сравнении зубным эликсиром «Кирславин».
Материал и методы
Работа выполнена на 48 половозрелых беспородных белых крысах-самцах с массой 200-250 г, которые содержались в стандартных условиях вивария. Исследования проведены в соответствие существующими руководствами по экспериментальному исследованию новых препаратов в фармакологии и в частности в экспериментальной стоматологии [3, 9].
Существуют различные способы экспериментального моделирования хронического пародонтита. Мы использовали модель хронического пародонтита, вызываемого через две недели после наложения лигатуры на нижние резцы по Chumakova Y.[10]. Животные были распределены на 6 экспериментальных групп по 8 животных. Группе интактных животных (группа №1) ни каких воздействий не проводили. Тридцати двум крысам накладывали лигатуры на передние резцы. Из них 8 животных с лигатурами на зубах исследовали на вторые сутки (группа №2), 8 животных на 14 сутки (группа №3), еще 8 животных исследовали на 10 сутки после снятия лигатуры (контрольная группа №4). Основную группу (№5) составили 8 крыс, которым спустя 14 дней, снимали лигатуру и ежедневно в течение 10 дней смазывали десны раствором стоматологического средства «Витар», разбавленным физиологическим раствором в 4 раза. В группе сравнения (№6) крысам смазывали десны раствором зубного эликсира «Кирславин», согласно инструкции по применению.
Эвтаназия животных проводилось гексаналовым наркозом. Ротовую полость промывали 2 мл физиологического раствора. Промывные воды центрифугировали. Осадок исследовали цитологически. 1 мл над осадочной жидкости смешивали с 10 мл гептан - изопропаноловой смеси и исследовали спектрофотометрически при длине волны на длинах волны 232 нм и 273 нм, определяя оптическую плотность соответственно общих липидов и гидроперекисей в условных единицах (ед.опт.плотн.). Окислительный индекс (ОИ) рассчитывали по отношению конъюгированных гидроперекисей к количеству общих липидов.
Ткани десны и внутренних органов фиксировали в формалине и готовили парафиновые срезы, окрашиваемые гематоксилином и эозином.
Результаты исследования
Через сутки после наложения лигатур значительных макроскопических изменений десен не наблюдалось. Микроскопически на поверхности эпителия десны обнаруживались тонкие пленки фибрина, под эпителием единичные кровоизлияния (рис. 1а).
Рисунок 1 – точечные кровоизлияния под эпителием на
первые сутки после наложения лигатур (а), дистрофия и гиперплазия плоскоклеточного неороговевающего
эпителия десны на 14 сутки (б). Окраска гематоксилином и эозином, увеличение: а –56 х, б – 80
Спустя 14 суток пришеечный эпителий выглядел гиперемированным, тусклым. Микроскопически слои многослойного плоского эпителия были неравномерной толщины, с выростами вглубь мягких тканей десны, в образовавшихся карманах эпителий дистрофичный с образованием тканевого детрита (рис.1б). Бактериоскопически обнаруживаются кокки и палочки.
Выявленные структурные изменения десен после снятия лигатур уменьшались, но не исчезали полностью. В основной опытной группе, с применением стоматологического средства «Витар» эпителий десен полностью нормализовался за 10 дней.
Микроскопически аллергической реакции на разработанное средство «Витар» не отмечено, эозинофилии в эпителии десен при курсовом смазывании десен не выявлены.
Биохимическое
исследование показало повышение
гидроперекисей
и
ОИ на
2
и
14 сутки моделирования пародонтита (Табл.).
Таблица – показатели перекисного окисления липидов при моделировании пародонтита
Группы
|
Общие липиды
(ед. опт.плотн.)
|
Гидроперекиси
(ед.опт. плотн.)
|
Окислительный индекс
|
№1 интактные
|
1,21±0,03
|
0,83±0,03
|
0,69±0,02
|
№2 2 сутки
|
1,22±0,03
|
1,13±0,03
|
0,93±0,03
|
№3 лигатура 14 суток
|
0,95±0,03*
|
1,18±0,03*
|
1,24±0,03*
|
№4 14 суток +
10контроль
|
1,07±0,04 *
|
0,85±0,03
|
0,80±0,04 *
|
№5 14 суток + 10
«Витар»
|
1,16±0,03 **,***
|
0,75±0,03**,***
|
0,65±0,03**,***
|
№6 14 суток + 10
«Кирславин»
|
1,23±0,04**,***
|
0,72±0,02**,***
|
0,59±0,02**,***
|
Примечание: * - критерий различия с 1 группой p<0,05
** - критерий различия с 3 группой p<0,05
*** - критерий различия с 4 группой p<0,05
Из таблицы видно, что на 14 сутки моделирования пародонтита отмечается
достоверное снижение оптической плотности общих липидов и повышение оптической плотности гидроперекисей. После снятия лигатур выраженность сдвига показателей ПОЛ уменьшается,
но общие липиды и ОИ достоверно отличаются от таковых у интактных животных.
При смазывании десен раствором «Витар» в течение 10 дней показатели ПОЛ полностью нормализовались до уровня отмечаемого у интактных животных (p>0,05), при этом они достоверно отличались от таковых у животных 4 группы при естественном заживлении пародонтита (p<0,05). При сравнении с зубным эликсиром «Кирславин» также усиливающим репарацию десен при моделировании пародонтита существенных различий не выявлено.
Заключение
Таким образом, проведенные доклинические испытания стоматологического средства «Витар» доказали его антиоксидантное действие, а также то, что обладает противовоспалительным, регенеративным, иммуностимулирующим и, что особенно важно, капилляроукрепляющим эффектом – способности восстанавливать микроциркуляцию крови, одну из главных причин возникновения заболеваний пародонта. Свойства стоматологического средства «Витар» по выраженности сопоставимы с таковыми как у зубного эликсира «Кирславин». Лечебно-профилактическое средство «Витар» обладают эффективностью, его можно применять довольно продолжительное время при лечении заболеваний пародонта.
Список литературы
1.
Патент КР 1796. Стоматологическое средство «Витар» / Субанова А.А.,
Белов Г.В., Зотов Е.П., Супатаева Т.У. 2015.
2.
Бутюгин И.А. Состояние системы перекисное окисление липидов - антиоксидантная защита в смешанной слюне у больных хроническимгенерализованным пародонтитом / Бутюгин И.А., Волчегорский И.А. // Клиническая лабораторная диагностика. 2014. №2. С 44-47.
3.
Воскресенский О. Н. Доклиническое изучение средств профилактики и лечения пародонтита (пародонтопротекторов) / Воскресенский О. Н. -К.: Авиценна, 2002. 16 с.
4.
Мараславин: дадим бой пародонтозу! [электронный ресурс] vbreket.ru/spravochnik/lekarstva
5.
Патент КР 345. Средство для лечения парадонтита “Кирславин” /Белов Г.В., Зотов Е.П., Сабурова Л.Б. Бишкек. Бюл.№4. 2000.
6.
Патент КР224. Средство для ухода за полостью рта и зубами "Аплидонт" /Зотов Е.П.,
Белов Г.В., Алымкулов Д.А. Сабурова Л.Б. Бюл.№2.1998.
7.
Патент КР225. Зубной эликсир "Фломираль"
/ Алымкулов Д.А., Зотов Е.П., Белов Г.В., Абасканова П. Бишкек. Бюл.№2.1998.
8.
Барер Г.М. Терапевтическая стоматология. Болезни пародонта. Часть 2. Москва.2009. 205с.
9.
Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Хабриев Р.У., Изд. Второе. Москва.2005. 211-215с.
10. Chumakova Y. Clinical and biochemical analysis of ligature-induced periodontitis in rats / Chumakova Y, Vishnevskaya A, Kakabadze A, Karalashvili L, Kakabadze Z. // Georgian Med News. 2014 Oct;(235):63-9.
11. Nibali L. Periodontitis and redox status: a review / Nibali L, Donos N. // Curr Pharm Des. 2013; 19(15):2687-97.