Челябинск
05 января 2016г.
Актуальность. Бронхиальная астма (БА) является одним из наиболее распространенных хронических заболеваний у детей, при этом многими исследователя подчеркивается повсеместная гиподиагностика заболевания. В настоящее время практическое значение имеет поиск и усовершенствование доступных неинвазивных скрининговых методов диагностики [1,2].
Цель работы
Выявить особенности иммунологических показателей индуцированной мокроты (ИМ) и слюны у детей с легкой интермиттирующей БА и возможность использования этих методов для диагностического скрининга.
Материалы и методы. В исследование включено 120 детей в возрасте от 6 до 18 лет, проживающих в г. Челябинске; из них - 75 детей с легкой интермиттирующей БА. На момент обследования дети находились в периоде ремиссии, не имели эпизодов респираторной инфекции в течение 1 месяца и не получали базисную терапию в течение последних 6 месяцев. Диагноз БА устанавливался в соответствии с критериями «Национальной программы» [2]. Группу контроля составили 45 детей без аллергических заболеваний.
Индукция мокроты проводилась по разработанной нами методике с использованием гипертонического раствора хлорида натрия 42 детям с БА и 13 детям группы контроля [3]. Слюну собирали натощак, без стимуляции. Исследование проведено 33 детям с БА и 32 детям группы контроля.
В ИМ и слюне определяли уровень IgE, sIgA, субклассов иммуноглобулинов IgG (1-4), IL-4, IL-8, TNFα; все результаты были пересчитаны на единицу белка. Обработка данных проводилась на базе пакетов прикладных программ Statistica for Windows 6.0 и SPSS 12.0, с использованием непараметрических методов, отображение результатов в квартилях (Q25-Q75). Для всех видов анализов статистически достоверными считались значения р<0,05.
Результаты и обсуждения
Иммунологические показатели ИМ обследованных детей представлены в Табл.1.
Таблица 1
Иммунологические показатели ИМ у обследованных детей
Показатели
|
Группа БА
|
Группа контроля
|
Me
|
Me
|
25-75%
|
25-75%
|
TNF-a, пг/мг белка
|
2,26
|
1,71
|
1,00-4,70
|
0,36-2,23
|
IL-4, пг/мг белка
|
0,96*
|
0,49
|
0,49-1,45
|
0,37-0,94
|
IL-8, пг/мг белка
|
102,4*
|
41,5
|
45,3-158,9
|
20,6-64,9
|
IgE, МЕ/мг белка
|
0,83*
|
0,24
|
0,38-1,31
|
0,10-0,50
|
IgG1, мкг/мг белка
|
2,77
|
1,93
|
1,58-3,46
|
1,51-2,80
|
IgG2, мкг/мг белка
|
0,7
|
0,47
|
0,35-1,26
|
0,32-0,67
|
IgG3, мкг/мг белка
|
0,42*
|
0,14
|
0,23-0,62
|
0,01-0,35
|
IgG4, мкг/мг белка
|
0,11*
|
0,01
|
0,03-0,25
|
0,002-0,14
|
sIgA, мкг/мг белка
|
95,7*
|
81,2
|
80,5-160,9
|
54,8-94,4
|
Примечание. * – значимость различий (р<0,05) с группой контроля.
В нашем исследовании содержание TNF-α – основного провоспалительного цитокина – при БА превышало значения группы контроля в 1,3 раза, а уровень IL-4, который является основным цитокином, вовлечённым в патогенез аллергического ответа, важнейшим и обязательным фактором индукции IgE, а также может стимулировать продукцию TNF-α, - был выше при БА почти в 2 раза.
Интерлейкин-8 (IL-8) – цитокин, поддерживающий позднюю фазу аллергического воспаления; отвечает за мобилизацию, активацию, дегрануляцию нейтрофилов, ангиогенез, подавляет синтез IgE. В нашем исследовании уровень IL-8 в группе с БА был в 2,5 раза выше по сравнению с контрольной группой (р<0,05).
Уровень иммуноглобулина Е (IgE), основная функция которого – связывание с тучными клетками и индукция их дегрануляции – в группе детей с БА был в 3,5 раза выше, чем в группе контроля (р=0,001).
Антитела класса иммуноглобулинов G (IgG) играют главенствующую роль в гуморальном иммунитете. В настоящее время выделяют четыре субкласса IgG. Клиническая значимость разных субклассов IgG состоит в их различной способности присоединяться к макрофагальным и нейтрофильным рецепторам и активировать комплемент. Известно, что субклассы IgG1 u IgG3 вырабатываются в основном в ответ на белковые антигены. Антигены полисахаридной природы вызывают синтез IgG2. Субкласс IgG4, подобно IgE, обладает цитотропными свойствами, с одной стороны, а с другой – может блокировать связывание общего IgE, снижая его мембраноатакующее действие.
Содержание субклассов IgG1 и IgG2 между группами достоверно не отличалось, а субклассов IgG3 и IgG4 было выше при БА соответственно в 3 и 11 раз, чем в группе контроля (р<0,05). Считается, что повышение уровня IgG4 сопровождается чрезмерной дегрануляцией тучных клеток, избыточной секрецией биологически активных веществ и обструкцией дыхательных путей.
Дефицит секреторного иммуноглобулина A (sIgА) усиливает проницаемость слизистой оболочки и способствует проникновению аллергена. Особенно этот механизм важен в случае ингаляционных причин развития приступа астмы. В то же время недостаточность sIgА приводит к активации инфекции в дыхательных путях. В нашем исследовании не обнаружено снижения содержания sIgА в мокроте при БА, что, возможно, связано с легким интермиттирующим течением заболевания.
Иммунологические показатели слюны обследованных детей представлены в Табл.2.
Таблица 2
Иммунологические показатели слюны у обследованных детей
Показатели
|
Группа БА
|
Группа контроля
|
Me
|
Me
|
25-75%
|
25-75%
|
TNF-a, пг/мг белка
|
8,2
|
7,09
|
(4,17-18,46)
|
(2,99-19,54)
|
IL-4, пг/мг белка
|
5,63
|
6,01
|
(3,45-12,07)
|
(2,43-9,71)
|
IL-8, пг/мг белка
|
263,5*
|
38,8
|
(126,3-579,6)
|
(43,2-374,7)
|
IgE, МЕ/мг белка
|
1,25*
|
0,007
|
(0,002-5,97)
|
(0,002-5,16)
|
IgG1, мкг/мг белка
|
0,75
|
0,3
|
(0,32-2,47)
|
(0,15-0,7)
|
IgG2, мкг/мг белка
|
0,42
|
0,2
|
(0,21-1,73)
|
(0,05-0,6)
|
IgG3, мкг/мг белка
|
0,17
|
0,08
|
(0,06-0,35)
|
(0,02-0,21)
|
IgG4, мкг/мг белка
|
0,04*
|
0,01
|
(0,01-0,13)
|
(0,0-0,05)
|
sIgA, мкг/мг белка
|
101,8
|
104,8
|
(71,48-140,5)
|
(61,1-136,6)
|
Примечание. * – значимость различий (р<0,05) с группой контроля.
В нашем исследовании содержание в слюне IL-8 при БА превышало значения группы контроля в 6,8 раза (аналогичные результаты получены при исследовании ИМ), а уровень IgE был в десятки раз выше по сравнению с контрольной группой (р<0,05). Также как и в ИМ, в слюне было высоким содержание субкласса IgG4 в группе с БА (р<0,05); не обнаружено снижения содержания sIgА при БА. Сравниваемые группы не отличались ни по уровню IL-4, TNF-α ни по содержанию субклассов IgG1-3 в слюне.
Таким образом, выявленные изменения иммунологических показателей индуцированной мокроты и слюны, характеризуются по большинству параметров однонаправленными сдвигами и могут быть использованы в качестве неинвазивных скрининговых методов исследования у детей для выявления бронхиальной астмы.
Список литературы
1. Глобальная стратегия лечения и профилактики бронхиальной астмы (пересмотр 2011 г.)/под ред. А.С. Белевского. – М.: Российское респираторное общество, 2012. – 108 с., ил.
2. Национальная программа «Бронхиальная астма у детей. Стратегия лечения и профилактика». – 4-е изд., перераб. и доп. – Москва: Оригинал-макет, 2012. – 184с.
3. Пат. 2364341 РФ Способ получения индуцированной мокроты у детей для оценки степени и характера воспаления слизистой бронхов / В.И. Куличков, Ю.Л. Мизерницкий, О.Г. Рыбакова, Е.Е. Минина, Я.И. Жаков. – №2008116364; заявл. 24.04.2008; опубл. 20.08.2009, Бюл. № 23. – 10 с.
|